Buněčná imunita a imunofenotypizace

Základní vyšetření lymfocytárních subpopulací v periferní krvi

Rozšířené vyšetření lymfocytárních subpopulací v periferní krvi

Vyšetření polymorfonukleárních lymfocytů v periferní krvi

Funkční testy lymfocytů

Ostatní testy

Imunofenotypizace buněk krevních malignit

Imunofenotypizace buněk metodou průtokové cytometrie

Imunofenotypizační analýza je součástí laboratorních diagnostických postupů nutných k určení přítomnosti klonu maligních buněk hematopoetického původu, jejich liniové příslušnosti, případně stupně diferenciace.

Imunofenotypizační vyšetření jsou zaměřena především na hematologická onemocnění typu akutní a chronické leukemie, lymfoproliferace/non Hodgkinské lymfomy, myelodysplastické syndromy, myeloproliferativní onemocnění a to v rámci diagnostiky či následného hodnocení follow-up (AML, MPAL, B-ALL, T-ALL, B-LPD), v některých případech též na detekci minimální reziduální choroby (MRD) u pacientů po chemoterapii či po transplantaci.

Fenotypizací lze určit klon mnohočetného myelomu a detailně analyzovat populaci plazmatických buněk též u nemocných s monoklonální gamapatií nejasného klinického významu (MGUS).

Lze diagnostikovat paroxysmální noční hemoglobinurii (PNH) vyšetřením PNH klonů (s vysokou citlivostí).

Imunofenotypizace je přínosná v diagnostice potransplantačních onemocnění.

Dále lze provádět analýzu T lymfocytů v populaci intraepitelových lymfocytů přítomných v biopsiích vzorků sliznice trávicího traktu u pacientů s celiakií.

V bioptických vzorcích sliznice trávicího traktu lze rovněž identifikovat B-NHL vycházející ze slizničních lymfocytů (MALT).

Vyšetřením eosin 5-maleimidu lze identifikovat pacienty se suspekcí na sférocytózu.

 Imunofenotypizace obecně využívá imunofluorescenčního průkazu povrchových, cytoplazmatických nebo jaderných molekul krevních buněk monoklonálními protilátkami s vyhodnocením vícebarevnou průtokovou cytometrií. Imunofenotypizace je náročné a drahé vyšetření, které je obvykle indikováno klinickým hematologem.

Vyšetřovaný materiál:

• heparinizované vzorky kostní dřeně, získané sternální punkcí nebo při trepanobioptickém vyšetření
• heparinizované vzorky periferní krve
• vzorky mozkomíšního moku
• pleurální, perikardiální výpotky
• ascitická tekutina
• lymfatická tkáň (nativní, nefixovaná)
• bioptické vzorky sliznice trávicího traktu

Vlastní vyšetření:

Vyšetření pomocí vícebarevné průtokové cytometrie se provádí na základě klinické suspekce lékaře, kterou je třeba stručně slovně uvést na žádanku. 

Analýza probíhá obvykle v několika stupních. Je volen optimální základní vyšetřovaný panel monoklonálních protilátek, který může být rozšířen v následném kroku dle získaného nálezu. V současné době využíváme až osmibarevného panelu monoklonálních protilátek, který přináší rozšířené možnosti pro přesnější a detailnější analýzu zkoumaných populací.

Interpretace výsledku imunofenotypizačního vyšetření:

Výsledek imunofenotypizační analýzy musí být vždy posuzován v kontextu klinického stavu pacienta a výsledků dalších laboratorních vyšetření.

Na výsledkovém listu je udáváno procentuální hodnocení jednotlivých buněčných populací, detailní popis zachycené patologické populace a podstatnou součástí je slovní hodnocení se závěrem.

Laboratoř se pravidelně zúčastňuje národních (SEKK, MLP-ÚHKT) a mezinárodních (INSTAND) cyklů externí kontroly kvality. Je zapojena do řady grantových projektů a zajišťuje též postgraduální a předatestační vzdělávání zdravotnických pracovníků FN i mimo rámec FN HK.